当科は、長年にわたりわが国における慢性関節リウマチや膠原病の治療・研究の
中心的役割を果たしてきました。 平成１０年４月、西村純二教授の就任以降も、 引
き続きリウマチ・膠原病の診療を活発に行っていますが、 加えて血液疾患、 内分泌
・糖尿病の専門医を充実させ、臨床面で免疫・血液・代謝内科の名称で 診療活動を
行う一方、研究棟では臨床免疫学部門として臨床各分野の専門医の立場から、種々
の自己免疫疾患の病因・病態の解明やペプチド免疫療法・遺伝子治療などの新しい
治療法の開発をめざして基礎的研究を行っています。

当部門では診療上, 自己免疫疾患, 血液疾患, 内分泌代謝疾患など多岐にわたる病態を取り扱うため, これらに関連した多彩な基礎的研究が行われている. すなわち, 自己免疫疾患や血液疾患におけるリンパ球や免疫グロブリン遺伝子の解析, TNFリガンドファミリーAPRILの解析, 細胞内脂肪滴構成蛋白に関する研究などである.

A.   関節リウマチ滑膜内B細胞の動態解析

B細胞除去療法の関節リウマチ (RA)における有効性, 抗環状シトルリン化ペプチド抗体など, RAに特異性の高い自己抗体の発見などから, RAの病態形成におけるB細胞の重要性が再認識されている. 我々はRA患者滑膜のRT-PCR-SSCP法による解析により, RA滑膜ではB細胞のオリゴクローナルな増殖がみられること,その一部は滑膜の離れた部位で共通に存在すること, オリゴクローナルなB細胞の増殖は長期に渡って安定してみられることを明らかにした. またmicrodissection法を用いた滑膜内胚中心様の構造物 (GCLS)の解析で, GCLS内ではB細胞のオリゴクローナルな増殖がみられ, その一部には段階的な突然変異の蓄積がみられること, しかしクラススイッチはみられないことを明らかにした. さらに免疫グロブリンd鎖のVH領域の塩基配列の解析から, B細胞のオリゴクローナルな増殖には体細胞突然変異の蓄積を伴うものと伴わないものがあることを, また滑膜内B細胞のあるものは滑膜内を活発に移動している可能性があることを明らかにした. さらにこのユニークなd鎖を発現するB細胞はメモリータイプのIgM⁺IgD⁺CD27⁺B細胞であると考えられ, circulating splenic marginal zone B 細胞類似のB細胞である可能性を指摘した. 現在これらのIgM⁺IgD⁺CD27⁺B細胞がRAの滑膜のどのような病変部に存在するのかを解析中である.

B. TNFリガンドファミリー, APRILノックアウトマウスの作成と解析

APRILはTNFリガンドファミリーに属するType II 膜蛋白である. APRILは,同じくTNFリガンドファミリーに属するBAFFとレセプター結合部位に関し, 28.7%の相同性を有する. BAFFのノックアウトマウスにおいて, 成熟B細胞は著明に減少していた. 一方BAFFのトランスジェニックマウスは, B細胞の著増, 血清免疫グロブリンの上昇, 抗DNA抗体, 免疫複合体の出現, 腎炎の発症およびそれによる蛋白尿等, ループス様の所見を呈していた. 以上の如く, BAFFはB細胞の成熟, 増殖に関与し, 自己免疫疾患の原因遺伝子である可能性もある遺伝子である. しかし, その相同蛋白であるAPRILに関しては, その詳細な機能は不明である. 今回我々は, APRILの全長をノックアウトしたマウスを作成し, 解析しているところである.

C. 骨髄非破壊的同種造血幹細胞移植法を用いた全身性強皮症の治療法の開発

全身性強皮症は皮膚の硬化と様々な臓器病変を伴い. 広範で高度の皮膚硬化は生活の質を著しく障害し, 心肺腎などの病変は生命予後を左右する. 強皮症の原因は不明であるが, 病初期には自己免疫学的機序が働き, 後期には線維芽細胞の増殖がおこると考えられている. これまで様々な免疫抑制剤による治療が試みられているが, 有効な治療法はない. 侵襲の少ない骨髄非破壊的同種造血幹細胞移植法を用いて, 免疫系の再構築を計り, 強皮症を治癒させる試み, すなわち合併症, 治療関連死の少ない骨髄非破壊的同種造血幹細胞移植を全身性強皮症へ応用し, 新規治療法の開発を行う. プロトコールの作成, 安全性と臨床効果の判定, キメリズムの解析, 免疫系の解析を行う.

D. 細胞内脂肪滴構成蛋白の発現調節機構と機能解析および病態における検討

a. adipose differentiation-related protein (ADRP)の発現調節機構

ADRPは細胞内脂肪滴表面に存在する蛋白で, 遊離脂肪酸の取り込みなど細胞内脂肪滴の形成に関与していると推測されるが, その機能はよく分かっていない. 肝細胞, マクロファージなどに極めて高い発現を認める. 肝およびマクロファージにおけるこの遺伝子の発現調節機構について解析した. とくにプロモーター上のEts/AP-1複合配列が極めて重要なエレメントであることを明らかにした. この蛋白の発現や機能を制御する方法を開発し, 細胞内脂肪の過剰蓄積に基づく病態, たとえば脂肪肝, 動脈硬化, インスリン抵抗性症候群などの治療への応用を探索する.

b. ADRPの病態における意義の検討

末梢血白血球におけるADRP mRNAの発現量を定量PCR法で測定したところ, 糖尿病や関節リウマチの患者で有意に発現量が高い傾向を認めた. これらの疾患は動脈硬化性病変の発症率が高い疾患であることから, ADRP発現量と動脈硬化進展との関連を探るため, 多数例の患者において末梢血白血球におけるADRP mRNA発現量と動脈硬化の危険因子, 頸動脈内膜中膜複合体厚などを経時的に追跡する研究を開始したところである.

c. ADRPと共役する蛋白の探索

ADRPと細胞質内で結合する蛋白としてYeast two hybrid SystemによりスクリーニングしたPME-1について, その生化学的解析を行っている.

E. 代替医療探索研究の推進

九州大学病院統合に伴い, 別府先進医療センターの研究機能の一翼を担うため, 特定保健食品, 生薬, 温泉など, いわゆる代替医療の効用に関する科学的エビデンスを集積する「代替医療探索研究拠点」の形成をめざしている. 現在, 大分県内の酒造会社と大分大学との共同研究により, 大麦焼酎粕エキスの生体に及ぼす効果について, DNAアレイを用いた解析を行なっている. ラット肝を用いた研究から, 脂肪肝抑制効果に関与すると考えられる種々の遺伝子の変動を検出しており, さらに解析を進めている.

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